考馬斯亮藍快速染色液

產(chǎn)品簡介：

考馬斯亮藍快速染色液(Commassie Blue Fast staining solution)是以考馬斯亮藍G250為染料可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白電泳膠的快速染色，亦可用于Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢測。

NobleRyder考馬斯亮藍快速染色液采用NobleRyder自主研發(fā)的技術(shù)，在傳統(tǒng)考馬斯亮藍快速染色液的基礎(chǔ)上進行改良，是一種無毒的染色液，快速染色液只需1h，可以檢測低達100ng的蛋白電泳條帶。其核心優(yōu)點在于：無需對凝膠進行固定，無需煮沸，無需脫色，染色時間短，操作更加簡單。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1、水平搖床或側(cè)擺搖床

2、蒸餾水

3、(可選)加熱裝置

4、20%甘油水溶液

操作步驟(僅供參考)：

1、PAGE電泳結(jié)束后取凝膠放入約50～100ml蒸餾水中，在搖床上搖動5min，棄液，重復(fù)上述步驟1次。

2、棄蒸餾水，加入3～5倍體積以上的Commassie Blue Fast staining solution，使染色液能蓋住凝膠。

3、(可選)凝膠置于考馬斯亮藍快速染色液中，在水浴鍋或微波爐內(nèi)加熱至95～100℃，立即從加熱裝置中取出。(此步驟可以使染色提高靈敏度或加快染色進程，亦可省略。)

4、在搖床上搖動染色，蛋白量大的條帶10～15min左右會出現(xiàn)，大部分蛋白條帶會在30～60min 左右出現(xiàn)。一般情況下，5h能獲得效果。

5、出現(xiàn)清晰的目標蛋白條帶即可停止染色，棄染色液。

6、加入適量的蒸餾水停止染色反應(yīng)。亦可以在搖床上搖動脫色5～10min，以便減少背景干擾。

7、把凝膠保存在水中，用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會發(fā)生溶漲。如需避免溶漲，可以把膠保存在含20%甘油水溶液中，長期保存可以制備干膠。

注意事項：

1、PAGE電泳后凝膠采用蒸餾水清洗的目的在于去除凝膠中的SDS等干擾物質(zhì)。如果不能充分去除SDS會導(dǎo)致背景較高。如果凝膠很厚，洗滌時間應(yīng)適當延長、洗滌次數(shù)應(yīng)適當增加。蒸餾水洗滌去除凝膠中的雜質(zhì)時，如果使用經(jīng)過加熱或沸騰的蒸餾水，每次洗滌時間可以縮短至 1～2min。

2、染色時如果把凝膠和染色液一起放置在微波爐中適當加熱，可以大大加快染色速度。但加熱時宜盡量避免沸騰，以免出現(xiàn)因暴沸而導(dǎo)致的凝膠碎裂。

3、如果希望染色的背景更低，希望獲得更加清晰的蛋白條帶，可以加入適量的室溫蒸餾水進行洗滌。通過蒸餾水洗滌可以進一步降低背景。在4℃蒸餾水中浸泡一段時間可以獲得背景更低，條帶更清晰的條帶。在次日對4℃蒸餾水浸泡一段時間的已經(jīng)進行了染色的凝膠再同前一天一樣進行染色和洗滌可以進一步改善染色效果，獲得更好的染色蛋白條帶。

4、本染色液呈酸性，有輕微腐蝕性，使用時請作必要防護。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

常見問題：

1、無染色條帶：可能上樣量太少，建議電泳時加適當量的BSA等作為陽性對照。

2、背景太高：可能雜質(zhì)沒有除盡，建議延長zui初的蒸餾水洗滌時間或增加洗滌次數(shù)。也可以在完成染色后，把凝膠放置在蒸餾水中在室溫或4℃進行洗滌。在4℃蒸餾水中浸泡一段時間，通?？梢匀〉幂^好的脫色效果。

3、染色條帶的靈敏度不夠理想：可以使用考馬斯亮藍快速染色液進行重復(fù)染色，重復(fù)染色可以改善染色效果。在加熱情況下染色可以顯著提高檢測靈敏度，另外染色后在室溫或4℃用蒸餾水進行脫色也可以顯著改善染色的靈敏度。

有效期：12個月有效。